卡氏肺孢子虫肺炎的实验室模型讨论

　　卡氏肺孢子虫感染是呼吸道一种严重的机会感染性疾病，20世纪50年代初，本病仅见于早产儿、营养不良儿，随着器官移植、肿瘤化疗的发展，免疫抑制剂和糖皮质激素的广泛应用，获得性免疫缺陷综合征的出现和流行，PCP的发病率剧增。

　　我省自1987年发现首例艾滋病以来，目前发现的艾滋病病毒感染者/艾滋病病人超过百例，艾滋病病人三十多例，他们大部分有呼吸道感染的表现，但是由于缺乏有效的检测手段，均未能明确诊断，影响采取及时的对症治疗。根据鼠的卡氏肺孢子虫与人的卡氏肺孢子虫之间在病原学形态、DNA及抗原性存在的共性，本文探讨大鼠PCP模型的建立，为开展人卡氏肺孢子虫的病原学形态观察、免疫化学、生物学特性及分子生物学的研究奠定基础。建立动物模型机理是基于当各种原因造成机体免疫功能低下时，潜伏状态的卡氏肺孢子虫将大量生长繁殖，形成“潜伏状态再激活”，引起病理改变和临床症状。报道中，用于诱导动物模型的动物有大鼠、BALB/C小鼠[2～4]和新西兰白兔[5]、猪[6]等，但以大鼠最为常用。国内多采用Wistar大鼠，而国外多采用SD大鼠。动物的诱导方式主要有两种：使用糖皮质激素或抗CD4单克隆抗体[7]。糖皮质激素的使用可以口服(将糖皮质激素加在动物的饮水中，让其自行饮用)，也可以皮下注射，但以皮下注射诱导的成功率较高。口服药物有醋酸地塞米松(1.5～2.0 ml*L-1)或强的松龙100 ml*L-1，注射常用药物有醋酸可的松每次25 ml或氢化可的松25 ml，每周2次，共进行6～12周。考虑到SD大鼠性情较Wistar大鼠温和，便于饲养、管理和给药，而且也与国外的方法接轨，本次研究采用SD大鼠。为了保证实验的诱导效率，采用了皮下注射醋酸可的松的方法，取得了较满意的结果，感染阳性率为96%，与国外的报道相似，较某些国内报道高。

　　在病原学检测方面，采用三种不同的染色方法，姬姆萨染色与瑞-姬姆萨染色和亚甲胺兰染色，其中前两者是染卡氏肺孢子虫的囊内小体，后者是染囊壁，联合使用不同机理染色方法的目的是提高诊断率和检测的准确性。实验中我们注意到姬姆萨染色与瑞-姬姆萨染色的效果相似，但是瑞-姬姆萨染色较姬姆萨染色简便、耗时少，可以考虑作为病原形态学的快速诊断方法。为了进一步提高检测的敏感性和特异性，国外已有采用分子生物学手段检测卡氏肺孢子虫DNA的报道，这也将是我们进一步要开展的工作。