遗传性抗凝血酶Ⅲ缺乏症的实验室检查

　　对于年轻血栓患者，复发性血栓或家族好发倾向者，是否值得进行实验室筛选，尚无统一意见，这种因为具有些此3项临床特征的静脉血栓患者中仅30%可查出属atⅲ或蛋白c或蛋白s缺乏。反之，atⅲ或蛋白c或蛋白s缺乏者中仅13%呈现上述本项临床特征。英国血液学会建议对年龄40～45岁静脉血栓、复发性静脉血栓或血栓性静脉炎、不寻常部位的血栓、明显血栓家族史者或反复习惯性流产者进行病因调查。低atⅲ活性水平有诊断价值。①免疫学试验测血浆atⅲ抗原；②交叉免疫电泳试验测定异常分子，在存在肝素下出现慢峰则提示atⅲ-肝素结合部位变异；③功能试验，包括atⅲ肝素辅因子活性试验和渐进性atⅲ抑制试验。辅因子活性试验是本病的最佳筛选试验，所有缺乏症均表现出异常。试验基于血浆加肝素后的fⅹa或凝血酶的灭活状况（肝素辅因子活性），培养时间缩短至低于30s能提高检测灵敏度。渐进性atⅲ抑制试验是基于缺乏肝素加速条件下atⅲ的蛋由酶抑制活性与靶物蛋白酶之间的互相反应。该试验能筛选出atⅲ-肝素亲和力受损的患者，表现为atⅲ渐进性抑制活性正常，但肝素辅因子活性低下。

　　atⅲ缺乏症分型：atⅲ缺乏症变异型已知50余种，分类方法尚未完善，可分为2型（表1）。

　　1.ⅰ型（atⅲ缺乏症） 属经典型缺乏症。患者不能合成atⅲ，故血浆atⅲ抗原和活性都降低。ⅰa型测不到变异蛋白，交叉免疫电泳泳动及峰形正常，但峰值减低。ⅰb型伴少量变异蛋白，散抗原性与活性的减少不成比例，抗原水平高于活性水平。交叉免疫电泳出现慢峰。这些变异蛋白与肝素的亲和力减低，和凝血酶无反应。分子病基础ⅰa型少数为大基因缺失或重排导致无功能等位基因。多数ⅰ型患者为外显子区的点状改变，如单个碱基替代、插入或缺失，而造成：翻译框架迁移；②过早生成终止编码子；③产生不稳定蛋白；④影响rna加工过程等机理参与分子病形成过程。

　　2.ⅱ型（atⅲ缺乏症） 本型血浆中半数atⅲ为变异蛋白，故抗原量正常但活性减弱。交叉免疫电泳中见慢峰（分子量增高），与肝素形成的复合物无活性。某些功能缺陷者的分子结构缺陷性质尚未明确。

　　ⅱa型：能试验显示atⅲ-肝素结合部位及atⅲ反应部位均有异常。

　　ⅱb型：仅反应部位异常。

　　ⅱc型：仅肝素结合部位异常。

　　ⅱa及ⅱb型变异体都产生无功能蛋白，主要是由于单个碱基替代，使反应部位功能异常。例如atⅲ north wick park arg393→cys。

　　ⅱc的单个碱基替代使atⅲ肝素结合部位功能异常，如atⅲ toyama，精47→半胱氨酸而无肝素加速，atⅲ活性。atⅲ rouen-1精47→组及atⅲ rouen-2精47→丝使肝素亲和力减低。ⅱc型仅肝素结合部位（辅因子）活性减低者的血栓发生倾向低。