小儿白细胞黏附分子缺陷Ⅱ型分子机制分析

　　本AA儿童的研究中，同样未发现患儿HLADR15频率存在成心义的增高[3]。这些个均提醒儿童与成人HLA类型AA易感性有可能存在差异。但这段一项研究则报道HLADRB1*1501呈现频率与成

　　人以及儿童AA均有显着相干[4]。

　　1.2 免疫调节因数基因多态性肿瘤坏死因数α（TNFα）与γ干扰素（IFNγ）是人的身体内重要的免疫调节因数，根据TNFα基因启动子308位点碱基替换的多态性，将其分为TNF1（-308G）以及TNF2（-308A）两类；编码IFN基因的VNDR（variable number of dinucleotide）定位于IFNγ基因熬

　　头里面含有子1349位点上。已经有研究报道VNDR基因多态性与儿童AA的发生显着相干。Gidvani等[5]接纳PCRRFLP要领检验测定73例患上到性AA患者6种差别细胞因数基因单核苷酸多态性，发现TNFα及IFNγ高产率型基因频率较没事了数据显着增高，此研究进一步证实TNFα以及IFNγVNDR基因的多态性与AA遗传易感性有关。

　　1.3 端粒酶基因突变端粒酶决定的端粒长短与许多疾病的发生密切相干，并且端粒长度跟着破裂回数的增多而逐渐缩短。端粒过短将导致其增殖能力衰竭、异常免疫攻击耐受性降低及其染色体不稳定性增加。TERC是编码端粒酶RNA的基因，正凡人有同样的TERC基因。研究发现AA的发病与端粒酶基因突变有关，但是在Field等[6]及Liang等[7]的研究中，均未发现AA患儿存在成心义的TERC基因突变。这表明成人与儿童AA发病机制有可能存在差异，关于端粒酶基因突变与小儿AA的关系尚有待进一步研究。

　　2 天然免疫异常

　　Toll样蛋白受体（Tolllikereceptor,TLR）首要分布在单核细胞、淋巴细胞及树突细胞等，它能辨认脂蛋白抗原，参与天然免疫反应。TLR能特别优异的与其配体结合，经由过程NFκB途径或经由其它通路导致细胞凋亡。与正凡人比较，AA患者CD4+细胞的TLR基因上调[8]。国外学者曾报道AA患者体内天然打死打伤（NK）细胞不但数量持续性地增加，活性也有所增加，并且数量会跟着造血恢复以及疾病的再次发作而有所改变。NKT细胞是淋巴细胞的1个亚类，表达恒定的T细胞受体，包括Vα24JαQ以及常见的NK细胞表面标记，NKT缺陷与多种人的总称自身免疫性疾病有关。NKT细胞可以按捺T细胞向Th1细胞的分化。已经有研究表明AA患者体内的NKT细胞明显减少，它们的缺陷有可能在AA的局部免疫粉碎中起到一定的效用。PRFI基因编码穿孔素，后者首要表达于细胞毒性T细胞（CTL）以及NK细胞，经由过程非Fas机制打死打伤靶细胞。国外学者这段报道AA患者存在PRF1基因突变[9]。存在PRF1基因突变的AA患者，其活化的CTL以及NK细胞胞质内穿孔素蛋白程度明显减低甚或缺失，溶细胞效用也明显减弱，匹敌原提呈细胞打死打伤力下降。该基因突变要患上抗原非常刺激持续存在，继续往前导致CTL不停增殖以及活化。虽然目前针对小儿AA天然免疫异常方面的研究鲜有报道，但因此上研究提醒天然免疫异常在AA的发病历程中阐扬一定的效用。

　　3 细胞免疫异常

　　国表里学者对AA患者细胞免疫异常方面的研究较为深入，众多研究表明CTL所介导的免疫异常是AA患者骨髓衰竭的首要环节，巩固免疫按捺治疗对AA的显着疗效也成为其有力的证实。

　　3.1 T细胞及其亚群数量以及表型的异常没事了心理状态下，CD4+、CD8+T细胞对维持有机体的免疫平衡起重要效用。CD4+T细胞根据其调节功效差别分为辅助T细胞（Th）以及按捺性T细胞（Ts）；CD8+T细胞根据其排泄的细胞因数谱分为Tc1以及Tc2。有学者对AA患儿与没事了儿童外周血淋巴细胞表型进行对照分析，发现AA患儿CD4+细胞减少，CD8+细胞显着升高，CD4+/CD8+比值减小；Th1以及Tc1程度明显增高，Th1/Th2以及Tc1 /Tc2比值也明显增高，并且与发病的严重程度有关[10]。

　　T细胞的1个亚群，调节T细胞CD4+CD25+ T细胞（regulatory T cells,Tregs），可按捺自身反应性T细胞，在自身免疫性疾病的成长与进程中起重要效用。Solomou等[11]研究发现AA患者Tregs数量与正凡人相比明显下降，而作为Tregs阐扬功效的重要转录因数FOXP以及NFAT1mRNA表达也有所下降。在一项在对免疫介导小鼠骨髓衰竭模型的研究中发现，Tregs的比率在小鼠体内是增高的，但是其细胞内不表达FOXP3,以是Tregs没有办法没事了阐扬其免疫按捺效用[12]。Chen等[10]的研究则发现特发性AA患儿外周血中与淋巴细胞活化相干的膜分子CD25+表达程度较没事了对照组显着增高，但CD4+CD25+T细胞表达程度以及CD4+CD25+/CD4+比值无明显差异。这些个研究均表明，Tregs在AA发病中阐扬重要效用，但是Tregs的数量变化及其确切效用机制以及效用成效尚有待临床进一步研究。

　　3.2 T细胞的免疫激活及其调节的异常CD69为T细胞激活标记，SAA患者CD4+以及CD8+细胞及慢性AA（CAA）患者CD8+细胞在受植物血凝素（PHA）非常刺激前CD69表达率高于没事了对照，受PHA非常刺激后CD69表达率更明显增高，尤以CD8+细胞群变化明显[13]。这说明AA患者的T细胞处于预激活状态，对外来非常刺激的激活潜能大。Th1、Tc1细胞排泄Ⅰ型因数IFNγ以及IL2,Th二、Tc2细胞排泄Ⅱ型因数IL10及IL4,两型细胞经由过程各自排泄的细胞因数互相按捺，比如IL10有按捺IFNγ以及TNFα的效用。

　　3.2.1T细胞在抗原非常刺激下克隆性增殖：T细胞受体β链可变区（TCRVβ）的互补决定区（CDR3）序列是T细胞克隆的区别标记，Vβ亲族的优势CDR3基因型代表相应的疾病特别优异性T细胞克隆[14],表现为Vβ以及CDR3偏颇。没事了的CDR3分布呈高斯曲线，经由过程度子免疫学试验发现，成人AA患者此曲线呈现数个单克隆或寡克隆明显增殖[15]。deVries等[16]发现AA患儿的TCRVβ偏态分布的程度明显高于健康对照组，免疫按捺治疗后，趋向于正态分布。有学者研究AA患者体内占优势的Vβ的习气性分布，发现CD4+Vβ亚亲族中，仅只有38%存在偏移曲线且主如果CDR3的多克隆分布；相对于的CD8+Vβ亚亲族中，有82%存在偏移曲线并多为CDR3的寡克隆分布。由此可猜测，多克隆T细胞被高度扩张的寡克隆淋巴细胞取代是AA发病肇始阶段的首要致病原因之一，CD8+CTL是导致骨髓衰竭的首要的效应细胞，这些个细胞的增殖有可能由自身细胞抗原以配合的机制诱导。

　　3.2.2CD4+细胞对T细胞分化的调节：AA患者Th以及Tc细胞都向Ⅰ型细胞分化，CD4+细胞在这类调节中的效用突出，它经由过程TLR阐扬其调节效用。Zeng等[8]经由过程基因芯片的要领研究发现，与正凡人相比AA患者CD4+细胞上TLR表达增加，其中TLR1、TLR2及TLR6的表达尤为显着。TLR活性增加就会被触动引发细胞因数的释放，它可诱导IFNγ、TNFα释放并激活共非常刺激旌旗灯号，促使T细胞向Th1标的目的分化，Th1/Th2失衡，诱导Th1细胞的适应性免疫应答，这一系列变化均与AA的发生相干。

　　3.2.3 T细胞转录因数Tbet对T细胞分化的调节：Tbet （Tboxexpressed in Tcell）是转录因数Tbox亲族中的一员，作为不分心性的IFNγ基因的反式激活剂，它能特别优异性地促进Th0向Th1分化并按捺Th0向Th2分化，并诱导已经分化的效应性Th2从头向Th1转化，是Th1细胞分化以及阐扬功效的要害性调节因数。AA患者的T细胞上存在Tbet蛋白的高表达[17],Tbet能够在没有任何前期非常刺激的情况下直接与IFNγ的启动子结合，诱导其转录。Tbet的高表达与细胞内的IFNγ以及IL12R程度相干，还与疾病的严重程度相干。

　　4 组织液体免疫异常

　　尽管有证据表明AA是一种T细胞介导的自身免疫性疾病，但直到现在尚无明确的目标自身抗原被发现。凡是自身抗原不仅引起T细胞克隆性增殖以及细胞免疫功效紊乱，同时也可引起B细胞介导的组织液体免疫紊乱。Hirano等[18]用重组cDNA表达文库的血清学分析技术，用AA患者血清对人的总称胎肝cDNA文库进行筛选，其研究结果表明kinectin有可能为AA患者体内的一种自身抗原，同时也证实AA患者体内存在组织液体免疫的异常。最近几年又发现3种新的AA潜在靶抗原，PMS1[19]、DRS1[20]以及膜突蛋白[21],但是它们在AA发病机制中的效用及其与小儿AA的关系尚待进一步阐明。

　　5 造血负调节控制因数排泄异常

　　众多的造血负调节控制因数是目前AA发病机制研究的热门。IFNγ，TNFα，转化生长因数β（TGFβ），IL二、6、八、1二、1五、18以及NO及一些黏着分子均对造血起负性调节控制效用。TNFα能按捺细胞克隆的形成，亦能加强T细胞、NK细胞的细胞毒效用；能使淋巴细胞、单核细胞、中性粒细胞增多且功效加强；能诱导NO合成，按捺骨髓造血细胞的增殖分化；可上调CD34+细胞表面Fas抗原，增速CD34+细胞凋亡，从而增速骨髓衰竭。IFNγ可诱导单核细胞、巨噬细胞、树突细胞等MHCⅡ类抗原的表达，使其参与抗原提呈以及特别优异性免疫辨认历程，加强抗原提呈细胞以及T细胞的彼此效用；可诱导细胞表达IL2受体，从而促进T细胞增殖，损伤造血祖细胞；可在多种细胞中诱导一氧化氮合酶（NOS）的合成，从而使集落形成受到限制，NOS可直接导致骨髓造血细胞凋亡。Dubey等[22]研究发现，AA患者骨髓中IFNγ，TNFα表达程度较对照组显着增高，并且骨髓中CD3+IFNγ+细胞比例增高；在应用ATG+CSA治疗后，其表达程度均降低。此研究表明骨髓中IFNγ，TNFα的高表达有可能促进了AA的发病。

　　6 造血干/祖细胞的缺陷

　　大量研究资料提醒，AA患者造血干/祖细胞（HSC/HPC）存在质以及量的缺陷。其质的缺陷有可能存在一定程度的遗传偏向，并导致AA与克隆性疾病如阵发性深度睡眠性血红蛋白尿（PNH）及骨髓增生异常综合征（MDS）临床表现上的重叠性。CTL可经由过程细胞毒效用直接打死打伤HSC;造血按捺因数则经由过程一些旌旗灯号途径诱导HSC凋亡，现发现的首要有Fas以及FasL途径，NO途径以及IL1B过转化酶途径。有学者研究发现AA患儿骨髓HSC/HPC缺陷首要表现为HSC/HPC细胞数量降低，尤其是CD34+CD38-早期HPC显着减少；HSC/HPC凋亡增加；CD34+细胞表达系分化抗原增加以及HPC增殖能力下降，其研究提醒T细胞免疫功效紊乱引起的HSC/HPC凋亡增加在儿童AA骨髓造血功效衰竭中起要害效用。

　　7 骨髓间充质干细胞的异常

　　骨髓间充质干细胞（MSC）在体表里都可阐扬免疫按捺效用，并可经由过程介导HSC粘附，排泄多种造血生长因数而阐扬造血支持效用，其中干细胞因数（stemcellfactor,SCF）能够非常刺激原始造血细胞增殖分化，在一定程度上反映骨髓基质的造血调节控制效用。已经有研究报道成人AA患者MSC的按捺T细胞增殖能力及其释放细胞因数的程度均较没事了对照降低。有学者研究发现AA患儿骨髓MSC支持骨髓单个核细胞（mononuclearcells,MNC）体外扩增的能力显着降低，并且细胞造就上清中SCF浓度显着低于对照，其研究进一步表明AA患儿骨髓MSC增殖能力减低与其排泄SCF减少有关，为骨髓MSC在儿童AA发病机制中的效用供给了线索。但是在Xu等[23]的研究中未发现AA患儿存在MSC免疫按捺缺陷，有关MSC与AA患儿发病机制的关系有待于进一步探索追究。

　　综上所述，小儿AA的发病机制万分庞大，细胞免疫异常是AA患儿骨髓造血功效衰竭的首要环节，Tregs、Tbet及TLR等均对T细胞分化及其调节阐扬重要效用。T细胞的免疫异常又激发了一系列变化，如IFNγ，TNFα等造血按捺因数排泄的增多，HSC/HPC凋亡的增加等，这些个均参与了骨髓衰竭的发生。以上机制的阐明为临床小儿AA的诊断以及治疗供给了重要思绪。跟着科学研究的进展，信赖小儿AA的发病机制将患上以更纤悉的阐明。