遗传学分析幼年型粒-单核细胞白血病

　　细胞遗传学和生物学特征

　　2.1 染色体

　　JMML在诊断时6%～24%有单体7，1997年Niemeyer等[6]报告110例JMML，有63例（64.3%）核型正常，25例（25.5%）有单体7，10例有单体7以外的核型异常，包括t（1；13），t（7；12），t（7；20），+13，+21，+8，+21等，25例单体7中有5例同时存在附加异常。核型正常者，当疾病进展时可获得单体7，同时发现单体7患儿在年龄、性别、肝脾肿大、淋巴结、皮肤浸润和伴多发性神经纤维瘤Ⅰ型表现上与正常核型者均无区别，且具有相似的生物学特征。

　　2.2 多发性神经纤维瘤Ⅰ型（NF1）基因

　　NF1是一种常染色体显性遗传病[9]，NF1儿童明显增加发展成恶性髓系疾病的危险，包括粒单核细胞白血病，急性髓系白血病。NF1基因位于17q11.2，1990年被克隆，编码信号蛋白神经纤维素（neurofibromin）。其功能是降解Ras-GTP为无活性的Ras-GDP，NF1基因在不成熟髓细胞中作为肿瘤抑制基因，通过影响Ras-GTP负性调节造血生长，这一假说从儿童伴NF1的白血病髓细胞生化及培养研究中和从单卵小鼠获得的无活性NF1基因细胞中Ras-GTP水平增高得到证实。约15%的JMML患儿伴有NF1，有15%无NF1证据而有NF1基因突变。有人用亚致死量照射小鼠重新组成NF1缺陷造血干细胞，发展成与JMML相似的骨髓增生异常。1996年Darry等[11]检查11例儿童NF1患者的骨髓细胞和恶性髓系疾病的NF1等位基因发现6例NF1等位基因缺失。NF1基因的丢失使细胞内的Ras信号传导途径激活，从而导致NF1患儿发展成白血病。

　　2.3 Ras基因

　　Ras基因是一种原癌基因，Ras基因的突变使Ras信号传导途径激活，是肿瘤发生的机制之一。异常克隆的形成和Ras途径的失调是白血病形成的两个不同阶段，Ras途径激活是JMML形成的前提条件。约50%JMML有通过Ras或NF1突变使Ras信号途径激活的证据。有人[12]通过等位基因限制性分析在36例不伴NF1的JMML中发现5例NRas,1例KRas突变发生在第一个编码外显子，且红系细胞带有同粒系细胞一样的Ras改变。

　　2.4 p53基因

　　p53基因是抑癌基因，p53基因突变与60%的癌症发病有关。Drorit等[13]用杂合性丢失单链结构多态性异二倍体顺序分析研究NF1和p53基因，结果在JMML诊断时NF1基因第31外显子有种系突变，在疾病进展时有野生型p53等位基因第6外显子的丢失，而未发现NF1等位基因丢失。说明在JMML肿瘤形成和进展中，NF1和p53是关联的，有人在12例NF1中发现7例有p53基因突变，为肿瘤形成的多步打击模型提供了例证。

　　2.5 细胞培养

　　多数实验研究显示[14]，在缺乏外源性造血因子情况下，粒单系祖细胞（CFU-GM）可大量自发生长，而正常造血祖细胞生长受抑，并且这种自发生长表现为对粒-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）具有选择性，抗GM-CSF抗体可选择性的抑制JMML克隆的生长，而其他生长因子抗体不能抑制其克隆生长。这种自发生长不是由于GM-CSF浓度增加所致，而是由于祖细胞对GM-CSF的敏感性增加所引起的。这种自发克隆生长很少见于其他MPD和Ph+CML及正常人。故细胞培养GM克隆自发性生长对JMML诊断起重要作用。